当普通的ODS色谱柱在100%的水相流动相中使用时，由于水相和填料表面的疏水基团相互排斥作用，ODS色谱柱的疏水性明显减低，使馏出物的保留减低。如上图例中，色谱柱在100%水相流动相中停留并过夜，比较 在过夜前和过夜后对核酸碱基分析的保留时间，腺嘌呤在过夜后分析的保留时间，其它产品(Brand Ⅱ)显示为在原来基础上降低89%，其它产品(Brand Ⅲ)显示为在原来基础上降低71%，而Hydrosphere C18的保留时间则可达到98%。Hydrosphere C18色谱填料设计为颗粒表面保留一定的亲水性，所以可实现水合作用。当Hydrosphere C18色谱柱用在含非有机溶剂流动相时，其保留时间不一定能够有效的缩短，但是，其色谱分离的结果可达到非常高的再现性。
上图显示了采用不同的色谱柱分离含有不同特性的混合样品的分离状况比较，Hydrosphere C18色谱柱与Pro C18色谱柱相比，具有更高的亲水性和低的密度，其结果是缩短了疏水化合物的保留时间，包括n-丙苯和n-丁苯，以及如双相化合物苊；而与此相反，具有大量氢基键合相特性的睾丸激素在Hydrosphere C18色谱柱与同样具有高亲水性表面的其它产品(Brand Ⅳ)相比，其保留时间更长。
碱性化合物阿米替林在其它产品(Brand Ⅳ和Brand Ⅴ)上，色谱峰会产生拖尾；而在Hydrosphere C18和Pro C18色谱柱上，即可获得良好的色谱分离；尽管阿米替林在Hydrosphere C18和Pro C18色谱柱上的保留时间相近，但是在这两种色谱柱上的最大不同是n-丁苯和阿米替林的分辨率不同，这是由于Hydrosphere C18填料表面的疏水性所致。
由此显示了Hydrosphere C18色谱柱与常规多用途的ODS色谱柱有着不同的分离特性，所以Hydrosphere C18色谱柱常用于分离在普通ODS不能很好分离的化合物。
