|
临床分离非可分型流感嗜血杆菌(NTHI)的基因组测序：这是一种高毒性菌株，从患有中耳炎的儿童体内分离得到，感染区域在耳膜和中耳之间。实验希望确定该基因组的可塑性和确认生物膜形成，致病性及慢性感染等性状相关的基因。所用文库是从Invitrogen购买的克隆于PCR4
blunt TOPO的文库，平均GC含量为38％。测序反应总体积600nl，模板60ng，引物1.25pmole，T7正向引物或M13反向引物，Big
Dye 190nl。热循环反应条件：96℃/20秒；然后96℃/0秒；50℃/0秒；60℃/45秒；共35个循环。然后用SPRI的方法进行样品纯化，在ABI
3730上进行测序反应。
(以上数据承蒙Allegheny
General Hospital基因组科学中心Dr.Garth Ehrlich，Dr.Fen Hu，Dr.Kai Shen允许引用)
|
